从男性患者收集外周血单核细胞，确诊为出血性烟雾病。使用仙台病毒颗粒重新编程外周血单核细胞，提供四种因子。无足迹的多能干细胞系的特征在于多能性标志物的表达和正常的核型。这些细胞能够产生胚状体和属于胚层的分化细胞的后代。该诱导多能干细胞系代表了用于模拟体外烟雾病疾病的合适工具，以研究该病理学发生的潜在细胞机制。血液样品由患有烟雾病的男性患者捐献。患者因急性左侧额叶大脑内血肿进入急诊室。计算机断层扫描血管造影未显示任何血管畸形，但另一方面，显示两侧远端颅内颈内动脉明显狭窄提示烟雾病。术后数字减影血管造影证实了烟雾病的诊断。
　　 纯化患者的外周血单核细胞并用仙台病毒颗粒感染，提供编码重编程基因的不同载体。两周后，在培养物中出现几个具有典型多能干细胞样表型的菌落。然后在转导后约挑选这些。分离，扩增不同的克隆并且随时间监测它们的表型。通过不同测定进一步表征烟雾病多能干细胞系和其他克隆。烟雾病多能干细胞显示在纯度上有规律地扩增，表现出正常的二倍体核型，没有可检测的异常，多能性标志物的表达。在证实缺乏残留的仙台病毒颗粒，表明表达指示了有效的完全重编程过程。的体外分化能力通过胚体测定法评估，产生成熟属于三个不同胚层的细胞，免疫反应性为外胚层，中胚层和内胚层的标记。此外，分化的烟雾病多能干细胞表达，与在分化的参考商业诱导多能干细胞系中评估的相当。烟雾病多能干细胞系的表征。多能干细胞集落和核型图的典型表型，显示正常的染色体。免疫表型分析揭示多能性标志物；仙台病毒基因组的丢失显示在培养物中。商业诱导多能干细胞用作多能性相关基因的阳性对照。蛋白质印迹分析显示烟雾病多能干细胞和同一患者从重编程的外周血单核细胞分离的几个克隆中多能性标志物的蛋白质表达水平。商业诱导多能干细胞用作阳性对照。烟雾病多能干细胞系的体外分化能力。分化培养物显示存在对外胚层，中胚层和内胚层胚层标记物具有免疫阳性的细胞。通过评估的外胚层，巢蛋白，中胚层和内胚层表达水平在从烟雾病多能干细胞获得的分化的培养物之间是相当的商业诱导多能干细胞用作参考。
　　患者的外周血单核细胞在细胞制备管中分离，并通过离心。然后将它们重悬于中，在室温下细胞的等分试样在补充有的胎牛血清中冷冻保存。将解冻的细胞培养在外周血单核细胞扩增培养基中的板中，所述培养基由血清游离培养基基础培养基，营养补充剂，青霉素/链霉素组成。干细胞因子，白细胞介素白细胞介素。每天更换培养基。根据制造商的说明，在无饲养细胞条件下转导外周血单核细胞，其中组分提供有仙台重编程试剂盒。感染后将最佳的多能干细胞样集落标记，挑选并转移到包被的孔中的主要作者培养基中。将烟雾病多能干细胞系和商业诱导多能干细胞系维持在培养基中，用基于的解离溶液进行每日培养基更换和定期分裂。
　　 收集诱导多能干细胞并在细胞团中解离。两天后，将细胞聚集体转移至主要作者培养基和补充有培养基混合物中。从第二天到实验结束，将细胞维持在培养基中。收集胚胎体并将其涂布在包被的孔上，并使其进一步分化。每隔一天更换一次培养基。按照制造方案用试剂分离，然后用合成试剂盒逆转录。使用血管内皮，通过报道的引物使用验证特定靶基因的表达。根据比较方法分析数据，并使用管家基因标准化。
　　 将细胞在缓冲液中裂解，并将总裂解物在聚丙烯酰胺凝胶上分级分离，用装置印迹到膜上，并在下与第一抗体杂交过夜。用合适的缀合的二抗检测信号。将细胞培养物用秋水仙中的在处理；根据标准方案收集中期。简而言之，将细胞与低渗溶液在室温下孵育一起温育并固定在乙酸/甲醇中。然后通过条带分析风干的中期扩散载玻片。使用配备有采集和分析进行显微镜观察。